SEALE lan masalah kontaminasi ing piring budaya multiwell

Loading lan nangani piring sel sonten:

Plato sel sel uga ngetutake prinsip asepsis sing ketat nalika nindakake operasi sel. Kabeh operasi kudu standar lan ilmiah, lan ora bakal nyebabake pengaruh tambahan ing wutah sel. Masalah sing paling umum yaiku carane njamin keseragaman sel kasebut sawise nambah conto lan nyilikake pengaruh kanggo ngganti medium ing negara wutah sel.

Takon:
Lids of 96 lan piring budak 24 sumur utawa piring petri banget ngeculke, sing cocog kanggo ventilasi, nanging bakal bakteri, cetakan lan polutan liyane uga mlebu?

Wangsulan:
Tutup iki banget longgar, sing kalebu budaya semi-mbukak, lan tujuane iki kanggo ventilasi (nyatane kanggo nggawe CO2 ing njaba sajian budaya kanthi lengkap lan njaga nilai pH budaya kanthi lengkap medium).
Kabeh duwe kaluwihan lan kerugian, sing mesthi nambah kemungkinan polusi. Kajaba iku, iki nyebabake Cairan ing sajian kanggo evaporate, sing kacathet kanggo obat-obatan sing tepat. Mula, rong langkah ing ngisor iki perlu: a. Udhara ing inkubator kudu resik (lampu sinar ultraviolet biasa, scrubbing alkohol, lan inkubator kudu dibukak lan ditutup sethithik sabisa) b. Kelembapan ing inkubator kudu tetep disimpen ing 100% (sink karo banyu steril sing diselehake ing incubator).
Kaya dra Petri, uga wadhah tutup kanthi tutup terbalik, lan ora bakal ditajis. Utamane amarga tekanan negatif saka airflow sing digawe dening "l" tutup, ana mikroorganisme sing dipasang ing bledug, lan bledug sing digawa ing pinggir tutup sing ngasilake tekanan sing negatif. Efek ventilasi mung liwat panyebaran udara, lan ora ana udara sing bakal digawe, saengga mung ambegan lan ora nembus bakteri.

Takon:
Nggunakake piring 24-sumerah, ana operasi ing sawetara sumur (ing bangku ultra), lan ana sel sing bakal ditumpaki ing sumur liyane. Aku kuwatir yen iki bakal nyebabake kontaminasi. Aku ora ngerti apa sing kudu dipikirake?

Wangsulan:
Yen operasi standar ing bangku ultra, mesthine ora apik. Aku mikir sampeyan bisa nggunakake lengkap tutup piring budaya, coba mbabarake bolongan mung kanggo dilakokno, lan nutupi bolongan liyane kanthi tutup.
Nimbang kanthi lengkap sadurunge nggunakake lan nggunakake kabeh bolongan; Yen sampeyan mung kudu nggunakake sawetara bolongan, sampeyan mung bisa nggunakake sisih siji, lan tutup liyane kanthi tutup. Aku digunakake kanggo nggunakake bolongan tengen dhisik (luwih trep kanggo nambah conto ing sisih tengen).

Yen operasi, gunakake sawetara geser kaca kanggo ngunggahake sisih siji, aja mbukak tutup kasebut, umume ora ana masalah.
Distribusi sel lan solusi sing ora rata

Takon:
Sel kasebut inocululated ing piring budaya, lan sel-sel kasebut ngumpulake ing bagean periferal, kepiye cara ngatasi?

Wangsulan:
Bisa takon kepiye sel dicampur? Apa pipetting utawa goyangake pira budaya? Yen iku sing terakhir, lan yen guncang ing bunder, kemungkinan yen sel kasebut bakal dibuwang menyang peripheral bagean amarga pasukan sentrifugal, ngasilake sel sing luwih sithik ing tengah. Luwih saka patang minggu!
Mangkene cara sing apik: sadurunge ngolah piring wiji, sijine piring budaya menyang inkubator kanggo sawetara jam jenuh lan banjur njupuk. Angkatan kudu entheng nalika nandur sel. Nambah alon ngidini penundaan sel kanggo mili menyang sumur piring, lan sel budaya umume tuwuh kanthi merata. Elinga ora bakal guncang karo shaker, utawa sel sampeyan bakal klumpuk kaya sing sampeyan ujar.
Sing luwih cilik diameter pira budaya, luwih jelas kedadean iki. Fenomena iki ora bisa diendhani kanggo 24 lan 96, amarga Cairan nganggep ing tembok supaya solusi budaya ing sumur kasebut ora dadi level cairan, nanging periphery dhuwur, kaya pangilon cekak. Nanging, nalika nggunakake rong jinis orifis iki, ora bisa ditambahake jumlah solusi budaya sing cukup amarga butuh intervensi tambahan, saengga sel "Edge" karo solusi budaya. Gumantung saka pratondho sing kudu diamati. Yen MTT, ImmunoHistokimia bakal mengaruhi asil amarga lapisan sel.
Nalika nyerna sel, elinga pipetting kanthi merata supaya ora ana slumps sel, lan jumlah solusi budaya ing sumur kudu cukup. Umumé, tambahake solusi budaya sing cukup nalika inoculasi, lan ngganti solusi kasebut nalika nambah campur tangan. Jumlah solusi budaya sing ditambahake ing solusi intervensi padha karo jumlah solusi budaya ing wektu inokulasi, ing kasus iki, kedadeyan "fenomena" pinggiran "pinggiran" bakal nyoba.

Takon:
Sing ditindakake yaiku eksperimen pembuka plak. Luwih becik nyebar sel ing lapisan seragam. Umume bolongan ora apik nalika virus kasebut ora bisa diobrol, lan ana sawetara sing ora seragam. Ana beda ing klompok sel kasebut. Aku kepengin takon apa cara sing digunakake nalika nambah sel?

Wangsulan:
Iki kritis kanggo pipette sel dadi penundaan siji-sel sawise pencernaan! Priksa manawa jumlah sel ing saben sumur padha konsisten nalika pisah piring!
Mesthi wae, ana uga faktor pangolahan. Paralelisme ing antarane sumur uga penting banget. Contone, nalika nambah obat, nyampur obat kasebut sawise dilatih kanggo mesthekake yen konsentrasi saben sumur konsisten!
Salajengipun, nalika nambah sel lan obat-obatan, klompok tes lan klompok kontrol kudu ditambahake kanggo ngindhari prabédan ing kapadhetan sol lan konsentrasi obat sing disebabake saka conto nambah conto!

Takon:
Jotosan kasebut wis seragam, nanging planking, 6 bolongan, lan 24 bolongan mesthi ora rata, lan sithik ing tengah. Kajaba iku, jelas yen pancacahan wis rampung, lan sawise sedina utawa loro, kapadhetan saben bolongan beda, sing bakal mengaruhi deteksi kasebut. Apa ana cara sing apik?

Wangsulan:
Yen sampeyan nggunakake pipette pasteur, aja nyedhot kakehan saben-saben, amarga sel ing pipette kanthi otomatis nglelebke, lan penundaan sel kasebut asring seragam, lan cairan bakal Tindakake rute S-form.
Yen sampeyan nggunakake pipet, tip kudu diproses lan dicopot supaya ora ngrusak sel, saengga saben cairan dijupuk cocog karo sumur. Iki luwih akurat kanggo nambah bolongan siji-siji kanggo tip. Nanging uga menehi perhatian kanggo nyampur penundaan kasebut.

Kanggo nyiyapake klompok paralel, n kudu cukup gedhe (sampeyan bisa ngetung).

Aja guncang sawise plating, amarga goyang bakal nyebabake sel-sel kanggo ngumpulake menyang tengah. Paling apik kanggo Plank sepisan.

Plat Budaya Porous Koro Yongyue Medical wis mesthi dianggep kontrol kualitas minangka urip perusahaan, lan ngupayakake daya saingan perusahaan sing terus-terusan. Perusahaan iki tansah nggatekake semangat perusahaan manut hukum lan peraturan, ketat karo disiplin dhewe, lan wani njupuk tanggung jawab karo layanan sing duwe kualitas lan layanan sing apik, lan ketemu kabutuhan pelanggan kanggo paling gedhe. Waca rangkeng-. Win-Win karo Pelanggan yaiku gol pangembangan kita. Medical Yongyue! Mitra sing dipercaya. Kita gelem kerja sama kanggo sampeyan kanggo nggawe masa depan sing luwih apik.